PCR (REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA)

USO DE PCR EN LA CIRROSIS HEPÁTICA

El presente artículo tiene por título "Detección de ARN de virus hepatitis C en la saliva de un grupo de pacientes con hepatitis C crónica". En el artículo se usa como método de análisis la Reacción en Cadena de la Polimerasa por Transcripción Inversa (RT-PCR) para identificar el ARN del virus. Así se identificará el causante de hepatitis que posteriormente puede desarrollar el cuadro crónico y así producir Cirrosis Hepática. Una de las principales causas de Cirrosis son las hepatitis y aún más cuando se vuelven crónicas. 

El PCR nos permite una rápida identificación por su utilidad a través de la amplificación;resulta mucho más fácil identificar con una muy alta  probabilidad virus o bacterias causantes de una enfermedad.

FUENTE DE INFORMACIÓN:
http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0001-63652008000300006&lang=pt

EPIGENETICA

EPIGENETICA EN LA CIRROSIS

La epigenetica es un fenotipo estable heredado, que resulta de los cambios en un cromosoma y sin alteraciones en la secuencia de ADN.

Las opciones mas actuales sobre epigenetica proporcionan una descripción centrada en 3 sistemas de regulación:

ADN (CPG; principal diana de la metilacion).

Modificaciones postraduccionales de las histonas.

MicroRNAs (miRNAs).

La metilación del ADN y el cáncer hepatocelular (HCC)

Lesiones epigenéticas típicas en el cáncer de hígado incluyen cambios en el genoma, la metilación del ADN, ADN-hipermetilación loci específicos, disfunción de enzimas modificadoras de histonas y la expresión anormal de ncRNAs. Existen patrones de metilación de ADN específicos para el cáncer de hígado. En la metilación del ADN en el cáncer hepatocelular humano se identifica 230 genes cuyos promotores eran hipometilados y había elevado expresión en HCC (epigenéticamente inducida), y 322 genes que fueron hipermetilados en tumores (epigenéticamente reprimidos). 

Genes epigenéticamente inducidos fueron asignadas a las vías de conducción de la diferenciación celular y la transformación, el crecimiento tumoral y la metástasis.

Genes reprimidos asignan a la apoptosis, la adhesión celular y la progresión del ciclo celular.

Un estudio de los virus de hepatitis B (VHB), inducida por HCC se compara con la metilación del ADN entre el tumor y el tejido adyacente, este identificó 1640 hipometilados y 684 hipermetilados en el tumor. En un estudio más enfocado, se identificaron los genes supresores de tumores que se hipermetilan en las primeras etapas del HCC (HIC1, GSTP1, SOCS1, RASSF1, CDKN2A, APC, RUNX3 y PRDM2).

El cáncer hepatocelular es un cáncer de hígado que constituye el 80-90% de los tumores hepáticos malignos primarios, cuya causa principal es la cirrosis hepática.

FUENTE DE INFORMACIÓN:

http://zl.elsevier.es/es/revista/gastroenterologia-hepatologia-14/biologia-celular-genetica-cancer-higado-13107573-progresos-hepatologia-2007

http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/hep.27131/full

ALTERACIONES EN LA TRADUCCION

ALTERACIONES EN LA TRADUCCIÓN: CIRROSIS

La traducción es un proceso en el cual la información del ARN-m se transforma a proteínas, está basado en la "leída" del ARNm que fue producido por medio del proceso de la transcripción. Cualquier cambio en el ADN que codifica un gen producirá una alteración del ARNm que es producido. Desde luego, el ARNm alterado puede conllevar a la producción de una proteína que ya no funciona como debe ser. El cambio de un solo nucleótido en el ADN de un gen puede producir una proteína que no funciona para nada.

En el hígado las células estelares se encuentran en el espacio de Disse y contienen gran cantidad de vitamina A, debido al daño hepático estas células proliferan inducidas  por la secreción autocrina y paracrina de citocinas tales como: el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) y el factor de crecimiento transformante β tipo 1 (TGF-β1); pierden su capacidad de almacenamiento de vitamina A; esto acasiona una transformación fenotípica a miofibroblastos , los cuales producen una gran cantidad de proteínas colagenosas y no colagenosas , acumulo de laminina α-1, tenascina y fibronectina. El hígado cirrótico tiene seis veces mas proteínas en la matriz extracelular que el hígado normal.

En el daño temprano se acumulan: fibronectina, colágenas tipo III y V; mientras que en el daño crónico hay incremento de colágenas I y IV, undulina, elastina y laminina.

Con el daño progresivo estas proteínas interaccionan  con las estructuras vasculares, produciendo una estructura anormal en forma de nódulos (característico de la cirrosis)

Las MMPs (metaloproteinas de la matriz) son las causantes del aumento de tejido fibrótico.

FUENTE DE INFORMACIÓN:

http://apps.elsevier.es/watermark/ctl_servlet?_f=10&pident_articulo=90224321&pident_usuario=0&pcontactid=&pident_revista=288&ty=104&accion=L&origen=gastromexico%20&web=www.revistagastroenterologiamexico.org/&lan=es&fichero=08vol68nums2.pdf

ALTERACIONES EN LA TRANSCRIPCIÓN

CIRROSIS: ALTERACIONES EN LA TRANSCRIPCIÓN

El proteasoma es un complejo proteico grande presente en todas las células eucariotas. Los proteasoma 20S núcleo catalítico se une a diferentes activadores (19S, 11S y PA200), para realizar funciones específicas, tales como la transcripción.

La vía de la ubiquitina-proteasoma es una de las vías vitales en la célula que se vuelve disfuncional como resultado del consumo de alcohol. La inhibición de la actividad del proteasoma en el núcleo provoca cambios en los factores de transcripción, modificación en las enzimas de las histonas, y por lo tanto, afecta los mecanismos epigenéticos.

Se cree que el etanol causa estrés oxidativo en los núcleos de las células para dañar el ADN y las proteínas, alterando de esta manera la integridad genómica. La inhibición de la función del proteasoma se asocia con la enfermedad hepática alcohólica aumentando su hepatotoxicidad y la exposición a etanol conduce a modificaciones post-traduccionales de las subunidades de tipo alfa de la proteasoma 20S.

Recientemente, la actividad del proteasoma se ha medido en los núcleos aislados a partir de células del hígado de ratas alimentadas con etanol crónicamente, y el proteasoma se encontró que se inhibió significativamente. Por tanto, la inhibición de la actividad del proteasoma en el núcleo está implicado etiológicamente en la acumulación de proteínas dañadas en el núcleo, y en la desregulación de la transcripción.

FUENTE DE INFORMACIÓN:

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2658853/