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viernes, 30 de enero de 2015

TERAPIA GENICA

TERAPIA GÉNICA: CIRROSIS

La terapia génica se ha desarrollado como un método de tratamiento de las enfermedades humanas basado en la transferencia de material genético a las células de un individuo. La finalidad es restablecer una función celular defectuosa. La terapia génica se basa en la combinación de tres elementos clave, el material genético a transferir, el método de transferencia y el tipo celular que incorporará dicho material genético.
La terapia génica en la cirrosis hepática está enfocada fundamentalmente a la prevención de la fibrogénesis, y la estimulación de la regeneración hepática. Muchas continúan en investigación en animales de prueba.
Regulación del factor de crecimiento transformante b (TGF-b).

La disminución de la actividad del TGF-b tiene como resultado una menor fibrosis.
Se puede bloquear específicamente su efecto haciendo que las células hepáticas expresen en su membrana una forma alterada del receptor del TGF-b que no sea capaz de trasmitir la señal intracelular tras su unión o disminuir su acción.

Envío específico a hígados cirróticos del gen del activador del plasminógeno urokinasa humano (huPA) modificado e insertado en el vector adenoviral (Ad-D huPA).

Activa mecanismos que inducen a la degradación del exceso de matriz extracelular y estimula la proliferación de hepatocitos. Reducción de la fibrosis, reducción en el número de células productoras de colágena, un incremento de MMP-2 y regulacion negativa de la expresión de genes de colágenas tipo I, III, IV y TIMP-1.

Aplicación del adenovirus recombinante AdMMP8, que contiene el gen MMP-8.

La metaloproteasa de matriz-8 (MMP-8) puede ser empleada para la degradación de exceso de colágena tipo I. Produciendo así la reversión de la fibrosis.

FUENTE DE INFORMACIÓN:

viernes, 16 de enero de 2015

STEM CELLS

STEM CELLS PARA CIRROSIS

Se ha propuesto la terapia celular en cirrosis por la escasez de donantes de hígado y las complicaciones derivadas de la terapia inmunosupresora. Ante esta necesidad de buscar nuevas fuentes para obtención de hepatocitos adultos, para enfermedades hepáticas, se proponen donantes en asistolia (ausencia completa de actividad eléctrica del miocardio) o donante neonatal.

La base actual para TCH reside en el transplante de hepatocitos adultos, células ya diferenciadas, sin embargo, las nuevas líneas de investigación están centradas en la obtención de hepatocitos derivados de células madre progenitoras pluripotentes.
Dentro de las células progenitoras de origen hepático se encuentran las progenitoras fetales hepáticas, los hepatoblastos y las células madre progenitoras hepáticas (células ovales, células bipotenciales), ya que se diferencian a colangiocitos y a hepatocitos. Constituyen una reserva de células que proliferan tras un daño hepático masivo y colonizan el parénquima hepático.

Las células madre se pueden obtener de diferentes fuentes como el blastocisto, la médula ósea e incluso hepatocitos maduros; pero la capacidad de proliferación y diferenciación de cada uno de estos tipos celulares es distinta y, entre otras consideraciones, es lo que va a definir su utilidad clínica final.

FUENTE DE INFORMACIÓN:

TRANSGENICOS

EJEMPLO DE TRANSGÉNICO EN LA CIRROSIS

Arroz transgénico para la producción de albúmina humana

Las semillas de este arroz transgénico pueden producir cantidades substanciales de albúmina sérica humana (ASH)1.En todo el mundo la ASH tiene gran demanda, debido a su papel en la producción de medicamentos y vacunas, así como para usarse en el tratamiento de pacientes con quemaduras graves y otras condiciones clínicas como cirrosis hepática.

La proteína derivada del arroz ha mostrado tener funcionalidad equivalente a la de la albúmina humana, siendo idéntica desde el punto de vista fisicoquímico y en ratas ha mostrado tener la misma eficacia médica y reactividad inmune. En ratas con enfermedad hepática demostró ser igual de efectiva en la mejoría de los signos asociados a la cirrosis sin evidencia de una reacción inmune mayor que la observada en ratas que recibieron la versión proteica derivada del plasma.

FUENTE DE INFORMACIÓN:

RATONES TRANSGENICOS

TEMA: Ratones transgénicos.

ANIMAL TRANSGÉNICO: Raton Knockout.
MÉTODO DE TRANSGENESIS:
1) Aislar células madre.
2) Agregar el gen inactivo con marcador.
3) Intercambio de genes naturalmente similares.
4) Agregar la droga.
5) Crecimiento de ratones quiméricos.
6) Elección del compañero masculino quimérico.
7) Prueba de raza y descendencia marrón.
8) Obtención de un ratón Knockout.

USO: El ratón Knockout se utilizo en la investigación de la función del gen OhNo en los ataques de pánico.

FUENTE DE INFORMACIÓN:
http://learn.genetics.utah.edu/content/science/transgenic/


jueves, 8 de enero de 2015

ADN RECOMBINANTE (ARTIFICIAL)

CIRROSIS: USO DE ADN RECOMBINANTE PARA VACUNAS CONTRA EL VIRUS DE LA HEPATITIS

La infección por el virus de la hepatitis B (VHB) es causa de hepatitis crónica, la cirrosis hepática, el carcinoma hepático y la muerte.
La vacuna contra la Hepatitis B es una vacuna desarrollada para la prevención de una infección por hepatitis B. La vacuna contiene una de las proteínas de la envoltura del virus de la hepatitis B, el antígeno de superficie de la hepatitis B. Lo que se espera lograr es que el sistema inmunitario pueda crear anticuerpos contra el virus de la hepatitis y se hayan establecido en la circulación sanguínea, para de esta manera adquirir memoria inmunitaria en contra de la hepatitis B.

Las vacunas en el presente se fabrican usando ADN recombinante. Las vacunas de ADN recombinado consisten en proteínas producidas por cultivos de levaduras modificadas geneticamente.
A diferencia de las vacunas derivadas del plasma humano, las vacunas por recombinación de ADN no se producen con el uso de células humanas o material proveniente de tejidos animales.


FUENTE DE INFORMACIÓN:

domingo, 21 de diciembre de 2014

ADN RECOMBINANTE

ADN RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA

El ADN recombinante que no se obtiene a partir de técnicas moleculares desarrolladas en laboratorios se conoce como:
RECOMBINACIÓN GENÉTICA: es un proceso biológico que se produce normalmente en todos los organismos, tras el cual se produce un cambio del genoma  y se verifica normalmente con la rotura y la reunión del ADN. Hoy en día es posible crear moléculas recombinantes entre segmentos de ADN que no presentan homología y que pueden proceder de organismos diversos. Con el uso coordinado de las enzimas de restricción y de los vectores moleculares, es posible aislar una secuencia de ADN de cualquier organismo e insertarla en el ADN de otro; a estas formas vivas que han sufrido tal transformación y que contienen un ADN extraño se las denomina transgénicas.

EJEMPLO:
Conversión génica
Es la segregación asimétrica de los Genes durante la replicación que conduce a la producción de cadenas recombinantes no recíprocas y la aparente conversión de un alelo en otro. Por tanto los productos meióticos de un individuo Aa pueden ser AAAa o aaaA en lugar de AAaa ; esto quiere decir que el alelo A se ha convertido en el alelo a o viceversa.

domingo, 14 de diciembre de 2014

TÉCNICAS DE HIBRIDACIÓN

TÉCNICAS DE HIBRIDACIÓN PARA CIRROSIS

Western blot 

Se separó el antígeno en sus diferentes componentes proteicos de acuerdo al peso molecular por electroforesis en gel de poliacrilamida-SDS al 15%. Luego las proteínas fueron transferidas por electroforesis sobre un papel de nitrocelulosa, donde fue enfrentado con muestras de sueros a la dilución de 1/20 para detectar IgG específico contra el antígeno (E/S) de Fasciola hepatica. Se usó la enzima peroxidasa conjugada con anti-IgG humano a una dilución de 1/1000 para localizar el antígeno anticuerpo. Se determinó el peso molecular de fracciones proteicas del antígeno usando estándares preteñidos comerciales de bajo peso molecular de 3 a 43KD.

Se consideró seropositiva la prueba de Western blot cuando en el suero se determinó la presencia de IgG específica contra las proteínas de bajo peso molecular de 14 a 27 KDa del antígeno crudo (E/S) de Fasciola hepática, fracciones que han sido consideradas por varios autores con alta sensibilidad y especificidad.

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